Yeast Lysates for Westerns
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来源: 蚂蚁淘
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Cells are grown for 2-3 days as 1.5ml prep. under selection for the plasmid of interest. Spin cells down 2.6K for 5min. Resuspend in 1ml 0.25m NaOH/1% 2-mercaptoethanol Incubate 10min on ice. Add 0.16ml 50% trichloroacetic acid Incubate for 10min on ice. Pellet 14K 10min. Resuspend pellet in 1ml ice cold acetone. Pellet 14K 10min. Air dry pellet and resuspend in 200-500ul SDS SB and proceed as described below in section on western transfer
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